如何選擇紫外分光光度計(jì)
紫外分光光度計(jì)廣泛用于實(shí)驗(yàn)室研究。如何選購(gòu)紫外分光光度計(jì)對(duì)于科研人員來(lái)說(shuō)非常重要。如何選擇紫外分光光度計(jì)？
紫外分光光度計(jì)的選擇主要考慮光學(xué)結(jié)構(gòu)、光譜范圍、樣品類型和分析工具。
研究人員有許多新的紫外分光光度計(jì)可供選擇。自從60年前紫外分光光度計(jì)出現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室的工作臺(tái)上以來(lái)，這種可以解決廣泛?jiǎn)栴}的儀器可以從單波長(zhǎng)測(cè)量到高性能多光譜測(cè)量和分析。科學(xué)家在選擇時(shí)需要考慮自己實(shí)驗(yàn)室的需求和目的。光學(xué)結(jié)構(gòu)和光源、檢測(cè)方法、樣品類型和數(shù)據(jù)處理都是需要考慮的因素。
光學(xué)配置
一般來(lái)說(shuō)，紫外分光光度計(jì)分為單光束和雙光束兩種。顧名思義，單光束型主要依靠單光束進(jìn)行測(cè)量。給定波長(zhǎng)的光束通過(guò)對(duì)照，然后通過(guò)實(shí)際樣品溶液以獲得吸光度結(jié)果。
雙光束型采用鏡面斬波輪將一束光分成兩束，分別測(cè)量對(duì)照樣品和實(shí)際樣品。可以限度地減少光漂移（燈漂移）并減少測(cè)量時(shí)間。有些雙光型光度計(jì)不使用斬波輪，而是使用分束器將一束光分成兩束平行光束，然后同時(shí)測(cè)量對(duì)照樣品和目標(biāo)樣品。由于測(cè)量速度的提高，雙光束分光光度計(jì)在測(cè)量某些溶液隨時(shí)間的動(dòng)態(tài)變化的研究中非常有用。
數(shù)據(jù)管理
大多數(shù)獨(dú)立的分光光度計(jì)都包含驅(qū)動(dòng)儀器操作和管理數(shù)據(jù)的軟件。高性能儀器通常與 PC 結(jié)合使用，需要制造商提供額外的軟件。同時(shí)，用戶還可以選擇升級(jí)軟件以滿足自己的需求。
另一個(gè)值得考慮的因素是數(shù)據(jù)的最終用途。每個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室都有自己感興趣的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。例如，一些藥品機(jī)構(gòu)需要考慮美國(guó)FDA的要求和歐盟藥品評(píng)價(jià)機(jī)構(gòu)的要求，選擇不同的數(shù)據(jù)處理方式。
光源及檢測(cè)方式（LIGHT SOURCES AND DETECTION）
分光光度計(jì)的光譜也是一個(gè)需要考慮的重要因素。實(shí)驗(yàn)室研究人員希望希望省錢(qián)，購(gòu)買(mǎi)專用設(shè)備來(lái)量化核酸、蛋白質(zhì)或細(xì)菌的生長(zhǎng)情況。
紫外分光光度計(jì)一般覆蓋190nm和380nm波長(zhǎng)，通常使用氘燈進(jìn)行照明。一些特殊的儀器可以提供滿足光子學(xué)和半導(dǎo)體研究需要的光譜范圍。
有些儀器有多種光源可供選擇：紫外光、可見(jiàn)光甚至紅外光（780nm到3000nm）。鎢燈和鹵素?zé)粢话阒桓采w可見(jiàn)光部分（約380nm到800nm）。氙氣燈可以覆蓋紫外和可見(jiàn)光區(qū)域。
分光光度計(jì)的帶寬很大程度上取決于單色器狹縫的寬度。可以準(zhǔn)確地投影出實(shí)驗(yàn)所需的光譜。嚴(yán)格的帶寬允許儀器對(duì)復(fù)雜混合物進(jìn)行高分辨率的吸光度測(cè)量。可變單色器的狹縫寬度使分光光度計(jì)能夠滿足各種實(shí)驗(yàn)需要。
為了測(cè)量吸光度值，分光光度計(jì)制造商通常使用光電倍增管（PMT）和光電二極管。 PMT 提供快速的響應(yīng)時(shí)間和良好的靈敏度，并且可以調(diào)整到 UV 光譜中的特定范圍。但是一些制造商依靠光電二極管的動(dòng)態(tài)范圍在幾秒鐘內(nèi)執(zhí)行所有光譜測(cè)量。
樣本格式
在大多數(shù)樣品類型中，分光光度計(jì)可以接受樣品孔、小玻璃管、比色皿、吸管和微孔板。微孔板主要是為了滿足高通量、大型實(shí)驗(yàn)室的需求。但即使對(duì)于小型實(shí)驗(yàn)室，廠家仍然提供各種容器轉(zhuǎn)換器來(lái)滿足吞吐量要求并減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
比色皿的進(jìn)樣量一般從1μl到5ml不等，有的儀器配備了各種樣品夾具，以滿足各種變化的需要。體現(xiàn)靈活性。
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